使用 qPCR 进行 COVID-19 核酸扩增测试 (NAAT)：样品制备工具

COVID-19 核酸 RT-PCR 检测：样品制备工具

SARS-Cov-2 核酸扩增试验 (NAAT) 是一种实时检测，旨在对上呼吸道标本（如鼻、鼻咽、口咽拭子标本）中的 SARS-CoV-2 病毒 RNA 进行定性检测。以下文章概述了 NAAT 样品制备以及每个阶段所需的工具和设备。

COVID-19 RT-PCR 检测样品制备阶段： 正确的样本采集、处理和制备对 RT-PCR 检测结果的准确性有很大影响。

标本灭活

可使用干浴培养箱在 56°C 下使标本失活。四个E 干浴培养箱 其可拆卸模块适用于不同的试管，是灭活的理想选择。许多公司都提供可以灭活核酸的 VTM 缓冲液。有关此类灭活试剂盒的更多信息，请 联系我们.

RNA提取

核酸需要从灭活的样本中分离出来。核酸提取通过三个关键过程：裂解、洗涤/纯化（如果是使用磁珠提取等固相提取方法则为洗脱）。在细胞裂解中，裂解试剂用于促进细胞破裂和释放核酸。然后使用洗涤缓冲液去除蛋白质、多糖和脂质等污染物，从而纯化 RNA。如果磁珠等固相载体用于结合核酸，则使用洗脱缓冲液。细胞悬浮液与裂解试剂的彻底混合是通过使用 旋涡混合器.在液相提取中，一旦样品进行离心，就可以从上清液中吸取 RNA。四个E 高速微量离心机 最大 rpm 为 15,000 是该过程的理想选择。

与所有分子生物学应用一样，无 RNAse/DNAse 吸管吸头 移液需要 RNA，因为 RNA 会很快被酶（如 RNAse）破坏。这 沉淀物^TM值 移液器系列 来自 Four E's Scientific 的移液器采用人体工程学设计，可实现无疲劳移液，旨在提供最高水平的精确度和准确度。

对于高通量核酸提取，可以使用基于磁珠提取技术的自动提取器。四个 E 提供两个自动提取器 多效 032 和 多效 096 分别提供 32 和 96 个样本的最大提取通量。自动化系统整合了结合、混合、洗涤、洗脱等所有纯化阶段，实现高效、高质量的纯化。该系统可与任何预填充的基于磁珠的试剂盒配合使用。

qPCR 设置

现在需要将提取的 RNA 添加到带有 qPCR 试剂混合物的 PCR 管中。PCR 主混合物将包括逆转录混合物、PCR 酶、引物和探针。 PCR管 和 移液器 用于制备主混合物。取标本N+2管RT-PCR混合液，加入提取的供试品RNA、提取的阳性对照RNA和阴性对照。盖上盖子，充分混合，然后用 迷你离心机.将反应管放入 定量PCR仪 并按照 qPCR 试剂供应商推荐的 qPCR 协​​议进行操作。四个 E 提供一系列 qPCR 仪器 每次运行的最大吞吐量为 16、48 和 96 个样本。

请提供有关 COVID-19 测试或任何分子生物学应用所需工具的更多详细信息 联系我们.

请注意：使用 RT-PCR 检测试剂盒进行的 COVID-19 核酸扩增检测旨在供受过实时 PCR 和体外诊断程序技术指导和培训的合格临床实验室人员使用。