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哗!核酸提取大揭秘

浏览数量: 19     作者: 本站编辑     发布时间: 2023-11-23      来源: 本站

关于核酸检测

伴随精准医疗概念的深入人心,医疗技术的不断进步,众多与疾病诊断、治疗及预后相关的标志物不断涌现,核酸检测正越来越普遍。

检验科日常检验中,核酸检测常用于感染性疾病分子检验、遗传性疾病分子检验及药物敏感性分子检验。

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作为核酸检测的基础,核酸提取结果的好坏直接影响最终的测试结果,

提取的核酸类型大致分为基因组核酸质粒核酸不同类型RNA三种。


核酸提取大致分为以下四个步骤,实际因样品种类及提取方法的不同而略有差异:

①细胞裂解 ②去除脂质、蛋白质及其他核酸 ③结合并纯化核酸 ④核酸浓缩

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常用核酸提取纯化方法分两类,一类为传统提取方法,包括:煮沸裂解法、酚氯仿抽提法、CTAB法、异硫氰酸胍/苯酚法

此类方法操作繁琐复杂,所需样本多(此处不一一介绍)。

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(酚氯仿抽提法)


另一类为固相吸附提取方法,包括阴离子交换法、硅基质吸附法、磁珠法

此类方法大多操作较为便捷,且得率佳。

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(硅基质吸附法)


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(磁珠法)


核酸提取分为手动提取和机器自动提取两种


● 手动提取核酸对操作者的经验有一定要求,由于操作者的熟练程度和操作习惯的不同会直接影响提取所用时间、提取的核酸浓度及污染情况,

此外,裂解过程所用试剂大多对人体有害;

● 机器自动提取仪降低人员经验要求,减少操作导入的误差,提取结果具备良好的重现性,提取结果正常满足下游检测需求,

同时减少人员与试剂的直接接触,保护人员安全。

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除临床检验外,核酸分析作为分子生物学的基础手段,

环境分析、食品检测、法医分析、国土安全等领域也展现了巨大的应用潜力。


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工作原理及步骤

32位核酸提取仪(示例)

MultiEX 032-核酸提取仪原理图

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